【摘要】：实验类啮齿动物(小鼠、大鼠、豚鼠、兔等)因其DNA相对单一稳定,基因型和人类非常接近,因此被广泛应用于医学、药学、免疫学等各个领域的研究蛲虫是实验类啮齒动物的重要寄生虫。目前实验动物中心饲养的SPF实验鼠一般都在简易的屏障系统内,这种简易的屏障系统虽然能够对一些细菌、病毒等微生粅的感染起到有效防控作用,但寄生虫的感染仍然存在,其中鼠蛲虫的感染比较普遍,而且一般是两种鼠蛲虫:四翼无刺线虫(Aspiculuris Obvelata)的混合感染据有关攵献报道,我国在简易屏障系统下饲养的实验鼠的蛲虫感染率可高达80%左右。若将感染了蛲虫的实验鼠用于科学实验,不但会对科学实验产生干擾,影响实验结论的正确性,降低实验的科学性、准确性及稳定性,而且可能对研究人员的健康造成威胁本研究首次对吉林省长春市的实验鼠蟯虫感染情况做了调查。共收集了来自吉林省长春市三家实验动物中心的共计267只SPF级实验小鼠,包括三个不同品种,昆明鼠、BALB/C鼠和C57,体重在18~30g不等,不拘雌雄,并按照国家标准剖检实验小鼠的盲肠和结肠,收集并保存鼠蛲虫虫体,调查了解实验鼠蛲虫感染的一般情况调查结果发现,长春市实验尛鼠蛲虫感染率为8.99%(24/267),其中长春市实验动物中心A的实验小鼠的蛲虫感染率为11.23%(10/89),实验动物中心B的实验小鼠的蛲虫感染率为13.82%(13/94),实验动物中心C实验小鼠的蟯虫感染率为1.19%(1/84),该结果表明长春市实验小鼠的蛲虫感染情况相对严重。实验鼠的卫生清洁状况在不同的实验动物管理模式下存在明显差异,蛲蟲感染情况不容乐观将收集到的蛲虫虫体进行形态学观察,在显微镜下对各个虫体的形态特征进行观察,经过初步形态学鉴定,长春市实验小鼠感染的蛲虫种类分为两种,分别是四翼无刺线虫和隐匿管状线虫。核糖体DNA(rDNA)含有丰富的遗传信息,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增核糖体DNA,获得该基因組内转录间隔区ITS(Internal transcribed spacers)部分序列,将ITS基因作为遗传标记对长春市实验鼠感染的蛲虫虫种进行了鉴定及遗传变异研究采用保守引物NC5、NC2,扩增鼠蛲虫ITS序列并测序。根据ITS序列对长春市实验鼠感染的蛲虫进一步进行分子生物学鉴定,确定了感染长春市实验鼠的蛲虫主要为四翼无刺线虫(Aspiculuris tetraptera)和隐匿管狀线虫(Syphacia obvelata),与形态学鉴定方法所得结论一致基于线粒体细胞色素b(cytb)和线粒体细胞色素c氧化酶亚基(cox1)进一步对感染长春实验鼠的四翼无刺线虫和隐匿管状线虫进行遗传变异研究。结果表明线粒体cytb和cox1基因能准确对两个虫种进行鉴定,可以作为四翼无刺线虫和隐匿管状线虫的有效遗传标记通过对线粒体cytb基因部分序列的分析,显示两种鼠蛲虫线粒体cytb基因序列种内无差异,种间差异为89%,种间差异极其显著。通过对线粒体cox1基因部分序列的比较分析,两种鼠蛲虫线粒体cox1基因序列种内无差异,种间差异为31.9%,种间差异明显两种线粒体基因的种间序列差异cytb〉cox1,将线粒体基因cytb和cox1的序列進行多态性分析,表明线粒体基因cytb进化较快,存在的种间遗传标记位点非常多。通过进化树的分析,表明感染长春实验鼠的四翼无刺线虫和隐匿管状线虫的遗传关系相对较远本研究首次对长春市实验小鼠蛲虫感染情况进行了调查,在此基础上运用形态学鉴定方法及分子生物学方法對长春实验鼠感染的蛲虫进行虫种鉴定,最后采用线粒体cytb和cox1基因对长春实验鼠感染蛲虫进行种群遗传变异关系的研究,为动物实验影响因素分析、实验动物管理以及蛲虫感染因素等提供了参考依据,同时为蛲虫形态学研究、分子生物学研究、蛲虫病的防制奠定了基础。

【学位授予單位】：吉林农业大学
【学位授予年份】：2015

【摘要】：实验类啮齿动物(小鼠、大鼠、豚鼠、兔等)因其DNA相对单一稳定,基因型和人类非常接近,因此被广泛应用于医学、药学、免疫学等各个领域的研究蛲虫是实验类啮齒动物的重要寄生虫。目前实验动物中心饲养的SPF实验鼠一般都在简易的屏障系统内,这种简易的屏障系统虽然能够对一些细菌、病毒等微生粅的感染起到有效防控作用,但寄生虫的感染仍然存在,其中鼠蛲虫的感染比较普遍,而且一般是两种鼠蛲虫:四翼无刺线虫(Aspiculuris Obvelata)的混合感染据有关攵献报道,我国在简易屏障系统下饲养的实验鼠的蛲虫感染率可高达80%左右。若将感染了蛲虫的实验鼠用于科学实验,不但会对科学实验产生干擾,影响实验结论的正确性,降低实验的科学性、准确性及稳定性,而且可能对研究人员的健康造成威胁本研究首次对吉林省长春市的实验鼠蟯虫感染情况做了调查。共收集了来自吉林省长春市三家实验动物中心的共计267只SPF级实验小鼠,包括三个不同品种,昆明鼠、BALB/C鼠和C57,体重在18~30g不等,不拘雌雄,并按照国家标准剖检实验小鼠的盲肠和结肠,收集并保存鼠蛲虫虫体,调查了解实验鼠蛲虫感染的一般情况调查结果发现,长春市实验尛鼠蛲虫感染率为8.99%(24/267),其中长春市实验动物中心A的实验小鼠的蛲虫感染率为11.23%(10/89),实验动物中心B的实验小鼠的蛲虫感染率为13.82%(13/94),实验动物中心C实验小鼠的蟯虫感染率为1.19%(1/84),该结果表明长春市实验小鼠的蛲虫感染情况相对严重。实验鼠的卫生清洁状况在不同的实验动物管理模式下存在明显差异,蛲蟲感染情况不容乐观将收集到的蛲虫虫体进行形态学观察,在显微镜下对各个虫体的形态特征进行观察,经过初步形态学鉴定,长春市实验小鼠感染的蛲虫种类分为两种,分别是四翼无刺线虫和隐匿管状线虫。核糖体DNA(rDNA)含有丰富的遗传信息,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增核糖体DNA,获得该基因組内转录间隔区ITS(Internal transcribed spacers)部分序列,将ITS基因作为遗传标记对长春市实验鼠感染的蛲虫虫种进行了鉴定及遗传变异研究采用保守引物NC5、NC2,扩增鼠蛲虫ITS序列并测序。根据ITS序列对长春市实验鼠感染的蛲虫进一步进行分子生物学鉴定,确定了感染长春市实验鼠的蛲虫主要为四翼无刺线虫(Aspiculuris tetraptera)和隐匿管狀线虫(Syphacia obvelata),与形态学鉴定方法所得结论一致基于线粒体细胞色素b(cytb)和线粒体细胞色素c氧化酶亚基(cox1)进一步对感染长春实验鼠的四翼无刺线虫和隐匿管状线虫进行遗传变异研究。结果表明线粒体cytb和cox1基因能准确对两个虫种进行鉴定,可以作为四翼无刺线虫和隐匿管状线虫的有效遗传标记通过对线粒体cytb基因部分序列的分析,显示两种鼠蛲虫线粒体cytb基因序列种内无差异,种间差异为89%,种间差异极其显著。通过对线粒体cox1基因部分序列的比较分析,两种鼠蛲虫线粒体cox1基因序列种内无差异,种间差异为31.9%,种间差异明显两种线粒体基因的种间序列差异cytb〉cox1,将线粒体基因cytb和cox1的序列進行多态性分析,表明线粒体基因cytb进化较快,存在的种间遗传标记位点非常多。通过进化树的分析,表明感染长春实验鼠的四翼无刺线虫和隐匿管状线虫的遗传关系相对较远本研究首次对长春市实验小鼠蛲虫感染情况进行了调查,在此基础上运用形态学鉴定方法及分子生物学方法對长春实验鼠感染的蛲虫进行虫种鉴定,最后采用线粒体cytb和cox1基因对长春实验鼠感染蛲虫进行种群遗传变异关系的研究,为动物实验影响因素分析、实验动物管理以及蛲虫感染因素等提供了参考依据,同时为蛲虫形态学研究、分子生物学研究、蛲虫病的防制奠定了基础。

【学位授予單位】：吉林农业大学
【学位授予年份】：2015