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【求助】人脂肪干细胞培养急！
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这个帖子发布于9年零364天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我准备养人脂肪干细胞，作了几次都不成功，是不是对人的年龄有要求？五六十岁的人行吗？大家都是用多少浓度的胶原酶呀？消化几分钟？裂解红细胞吗？多少转离心？用10％的DMEM行吗？我每次24h第一次换液时都观察不到贴壁细胞，是没有消化下来吗？还是操作时间太长了，细胞有损伤，我一般要两个半小时。本人非常着急，希望有着方面经验的大侠能帮一下忙，十分感谢！！！！！如果可能的话，能讲一下具体操作吗？
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1、年龄当然是越年轻越好，但是50－60的人也可以培养出来2、胶原酶一型或者二型都可以，浓度用0.1%-0.075%的都可以，消化的时间是37度40－60min3、不裂解红细胞4、10％FBS（需要是进口的），DMEM低糖或者DF12 都可以5、没有看见细胞贴壁就不要去悬浮，当然一般24小时就贴壁6、种植密度要大一些，2－6X10的7次方种T25的瓶子就可以了7、离心的转速是8、注意消化完离心的第一次要用移液管把上清轻轻吸走，如果采取倒的方式，会把沉淀的细胞团也倒掉9、而且最好换一下离心管，这样可以减少一些油脂，油多了也会影响细胞生长。
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十分感谢作出这么详细的解答，我还有些不明白的地方想请教一下，一般一次要用多少脂肪量呀？培养基还用加其他生长因子吗？谢谢！！！！！！！！
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还想问一下一次实验需要的脂肪量得多少？我是5ml，是不是有点少了，大家都是用多少啊？
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关于丁香园康婷干细胞是真是假_百度知道
康婷干细胞是真是假
康婷干细胞是真是假
我有更好的答案
绝对是真实的
中国完全没有这项研究
虚假的，国内只有造血干细胞移植治疗被批准应用于临床了。
做过不是那么简单的，想做这个行当数字佳我聊，，，，，，
传销公司的产品你也敢买？！
3条折叠回答
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