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【意康】小反刍兽疫症状
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官方公共微信龙庭一族的贴吧小反刍兽疫病毒、传染性胸膜肺炎丝状支原体和黏膜腹泻病毒混合感染奶山羊的诊断与防制
马国文1,2，张永富3，武克炳1，马1，丁& 超1&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&（1.包头尚科动物疾病研究所 内蒙古包头 .内蒙古民族大学 内蒙古通辽.包头广播电视大学 内蒙古包头 014010；）
摘　　要& 对一个羊场的病羊进行了流行病学调查、临床病理学检查和血清学检测，发现该羊场的羊病具有如下特点:1、具有传染性；2、发热、浆液性脓性鼻液、浆液性脓性眼分泌物、口腔溃疡、咳嗽、腹泻；3、小叶性肺炎、大叶性肺炎、胃肠炎、口腔炎、鼻炎、结膜炎；4、被检测的3只病羊的小反刍兽疫病毒抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）均为阳性、其中1只传染性胸膜肺炎抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性；另一只黏膜腹泻病毒抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性。诊断结果说明, 小反刍兽疫病毒可以与传染性胸膜肺炎丝状支原体及黏膜腹泻病毒混合感染于奶山羊。
关键词& 奶山羊；小反刍兽疫病毒；丝状支原体；牛黏膜腹泻病毒；酶联免疫吸附试验；防制
小反刍兽疫（Peste des petits ruminants, PPR）又称伪牛瘟，也叫羊瘟。是由小反刍兽疫病毒引起小反刍兽的急性或慢性传染病，主要症状为发热，口腔黏膜溃烂，进而引起腹泻和肺炎。与牛瘟病毒有交叉免疫。世界动物卫生组织（OIE）已把小反刍兽疫（PPR）列为A类疫病，中国将小反刍兽疫定为一类传染病。本病在世界上地理分布如下:该病原发于西非，根据OIE和最近的报导，在位于大西洋和红海之间的大多数非洲国家证实已经有PPR的存在，感染的地区向北扩展到埃及，向南扩展到肯尼亚，向东扩展到加蓬；在北非和南非的大部分地区还没有证实羊受到PPR感染。近年，PPR传播到远东地区和阿拉伯半岛，包括伊朗、伊拉克、以色列等10个国家和地区。现在，邻国如俄罗斯、印度、老挝、尼泊尔、孟加拉国、缅甸、巴基斯担和阿富汗等也相继暴发了小反刍兽疫。在我国，小反刍兽疫首次于2007年在西藏自治区日土县热帮乡龙门卡村发生。2013年，新疆巴州轮台县策达雅乡萨依巴格村的山羊也发生小反刍兽疫；2014年，我国多个省区陆续报道有小反刍兽疫的发生；牛病毒性腹泻／黏膜病是牛腹泻病毒引起的牛、羊和猪的一种接触性传染病。该病呈世界性分布，广泛存在于美国、澳大利亚、英国、新西兰、日本和印度等国家。我国20多个省区都有本病的发生。该病已成为严重危害我国养牛业的传染病之一。牛病毒性腹泻／黏膜病与同属内的猪瘟病毒和绵羊边界病毒存在抗原相关性，血清学上存在交叉反应，而且能够突破宿主特异性发生交叉感染，因此，牛病毒性腹泻／黏膜病不仅感染牛，也感染绵羊、山羊、猪、鹿和其它动物，对于牛羊，牛病毒性腹泻／黏膜病主要以消化道黏膜糜烂、坏死，胃肠炎和腹泻为特征；传染性胸膜肺炎是由丝状支原体丝状亚种引起的牛及其他反刍动物的一种传染病，简称为牛肺疫，本病急性以咳嗽、流鼻液、高热稽留、呼吸困难为特征，慢性则表现为渐进性消瘦、偶而干咳等症状，其病理特征是纤维素性肺炎和浆液性纤维素性胸膜炎。本病为一古老疾病，曾在不少国家流行，目前仍尚存于亚洲、非洲和拉丁美洲的一些国家。我国西北、东北、内蒙古、西藏等地也曾有过流行，上世纪60年代我国已宣布消灭了本病，但现已死灰复然，不少地区又有此病的发生，近两年，笔者在临床中发现我地区的牛羊有本病的发生。
目前，小反刍兽疫与羊传染性胸膜肺炎及黏膜腹泻病毒（BVDV）混合感染奶山羊还没有报导。作者在日，对一个羊场的病羊进行了小反刍兽疫病毒抗原、羊传染性胸膜肺炎抗原、黏膜腹泻病毒（BVDV）抗原的ELISA检测，为了类症鉴别，还同时进行了传染性鼻气管炎抗原、呼吸道合胞体抗原的ELISA检测，结果发现，被检测的3只病羊中，小反刍兽疫病毒全部阳性，其中1只羊传染性胸膜肺炎抗原阳性，1只羊黏膜腹泻病毒腺病毒阳性，而其它疾病则为阴性，现将小反刍兽疫与羊传染性胸膜肺炎及黏膜腹泻病毒（BVDV）混合感染的诊断与防制结果报告如下
1　 材料与方法
病料：病料采集于一羊场的病羊，对就诊和自然死亡的病羊采集其血液、各脏器组织。
1.1．2　主要仪器：
酶标仪（型号DNM-9602& 北京普朗新技术有限公司& 生产日期& 2010年5月& &&出厂编号： ）
微型振荡器 （型号 ZW-A 金坛市科析仪器有限公司& 出厂日期2008年10月）恒温水浴锅& （型号HH-1型& 北京科伟永兴仪器有限公司&& 出厂编号 6&& 生产日期2010 1 ）
高速离心机& （型号TGL-16A& 浙江金坛市环宇科学仪器厂& 生产日期& 2011年3月&& 出厂编号&
&ELISA试剂盒
购自贝茵莱生物技术有限公司，批号：201406
1.2.1　 抗原检测
应用ELISA方法检测了小反刍兽疫病毒抗原、传染性胸膜肺炎毒抗原、腹泻黏膜病毒抗原，呼吸道合胞体病毒抗原及传染性鼻气管炎抗原，在操作时，严格按照试剂盒的说明书进行。
1.2.2　 ELISA检测结果判定
按试剂盒说明书所示进行结果判定。
　流行病学特点
日，在我区西部的一个羊场里，发生了一种与小反刍兽疫相似但症状比较复杂、呼吸道症状明显，病死率高的传染病，成羊、羔羊均可发生，但羔羊发病较多且死亡率高。发病后，当地兽医曾用多种抗生素及磺胺类药物治疗，但无任何效果，发病羔羊死亡率达100%。作者对这个羊场的3只被检羊应用ELISA方法进行多种抗原诊断时，发现这3只病羊全部被小反刍兽疫病毒感染，其中1只羊的传染性胸膜肺炎抗原还呈现阳性，另一只1只羊的黏膜腹泻病毒抗原也呈现阳性，而传染性鼻气管炎病毒、呼吸道合胞体病毒等则全部为阴性。
病羊主要呈现急性经过，但发病后症状不尽相同，有的厌食或不食，精神多沉郁；多数发热，体温多在41℃以上，呈高热稽留；眼睑肿胀,大量流泪；呼吸急促，咳嗽，鼻腔依次流出浆液性、粘液性、脓性分泌物，肺部扣诊出现浊音,听诊出现罗音和胸腔摩擦音；口腔黏膜不同程度的溃疡；病羊均发生程度不同的腹泻，有的粪便呈水样，有的粪便呈稀糊状，后期粪便含有粘液及脱落的肠黏膜，因持续腹泻，病羊呈现不同程度的脱水；后期病羊卧地不起，呼吸极度困难，全身颤抖，可视黏膜发绀，目光呆滞，发出痛苦的呻吟声，最后因多个器官功能衰竭、营养不良、水盐代谢及酸碱平衡障碍而死亡，濒死前体温降至常温以下。
对2只同时感染小反刍兽疫、羊传染性胸膜肺炎及黏膜腹泻病毒的奶山羊进行了剖检，发现病变主要集中在消化系统，呼吸系统和免疫系统。在消化道，口腔、咽喉、食道等处的粘膜均发生不同程度的糜烂、溃疡，溃疡大小不一，形如火山口；瘤胃、网胃，瓣胃和皱胃等处的粘膜不同程度的糜烂，粘膜极易脱落，尤其皱胃粘膜糜烂更为严重。十二指肠，空肠，回肠，结肠，盲肠及直肠的黏膜面以出血、充血和水肿为主，同时可见粘膜脱落，肠腔内容物稀薄，气味恶臭；在呼吸系统，鼻腔内粘膜有与口腔相类似的糜烂和溃疡，气管和支气管粘膜有出血点，肺脏表面及切面散布着多个暗红色、灰色或灰红相间的质地稍坚实的病灶，尤以尖叶、心叶及隔叶前方的病变为重，病变切面呈大理石样；胸腔充斥多少不等的淡黄色液体， ，心肌松弛、变软；在免疫系统，脾和淋巴结受损严重，脾脏颜色变浅，质地变硬，有大小不一的坏死灶。肠系膜淋巴结、颌下淋巴结、肩前淋巴结、肺门淋巴结及其它处的淋巴结均肿大，表面还有多寡不一的小出血点。另外，肝脏亦肿大，胆囊肿胀；肾肿大表面散在大小不一的出血点。
&&&&&&&&&&&&
组织变化特点
小反刍兽疫病毒和黏膜腹泻病毒均可作用于呼吸系统、消化系统及淋巴系统，而丝状支原体则主要作用于呼吸系统，因此，混合感染的病例其呼吸系统、消化系统及淋巴系统所造成的损伤远较单一病原作用的为严重。
呼吸系统病变具有特征性，尤其是肺脏和胸腔。既有小叶性肺炎的变化，又有不典型的大叶性肺炎的变化，小叶性肺炎的特征是病灶以小支气管为中心并波及到周围肺泡的渗出性炎症。不典型的大叶性肺炎的病变范围较大，质地如肝，色彩斑驳，表现为浆液性纤维素性胸膜肺炎的特征，肺脏可见浆液性纤维素肺炎特有的充血期、红色肝变期、灰色肝变期以及各个过度期的色彩，处在充血水肿期的病变区可见肺泡壁毛细血管扩张充血，肺泡腔内可见浆液性渗出物，其中见少量红细胞、、淋巴细胞、肺泡巨噬细胞；处在红色肝变期的病变区可见肺泡壁毛细血管仍扩张充血，肺泡腔内充满含大量红细胞、一定量纤维素、少量嗜中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的渗出物；处在灰色肝变期病变区可见肺泡腔渗出物以纤维素为主，纤维素网中见嗜中性粒细胞、淋巴细胞，红细胞较少。肺泡壁毛细血管受压而呈贫血状态。由于大量支原体在小叶间隔中繁殖，所以间质炎性水肿及间质增宽。病肺呈紫红、红、灰红、黄等不同色彩，质度如肝，呈大理石状外观。病肺与胸膜轻度粘连，胸膜有少量纤维素附着。胸腔有淡黄色并夹杂有纤维素之渗出物。支气管淋巴结和纵膈淋巴结肿大、出血。心包液混浊且增多。
消化系统也具有特征性，可见消化道各个肠段上皮黏膜发生广泛性变性、坏死、脱落，甚至溃疡的形成，溃汤部位的粘膜下血管有血栓形成。各级血管扩张充血，在黏膜层及黏膜下层有多量红细胞渗出及多量的淋巴细胞、中性粒细胞浸润及多核巨细胞形成，在残存的黏膜细胞胞浆内可见嗜伊红性包涵体，也可在胞核内见到核内包涵体。
在淋巴系统，脾脏、扁桃体和各处的淋巴结可见主质细胞的坏死，表现为核固缩、核破裂或核消失，淋巴小结及脾小体及脾索细胞稀疏，淋巴细胞数量减少。早期窦壁细胞水泡变性，核内和胞浆内都可见包涵体，窦腔内可见多核巨细胞，后期窦壁细胞坏死脱落。
ELISA抗原检测结果
对上述羊场的3只病羊分别进行了小反刍兽疫病毒抗原检测、传染性胸膜肺炎丝状支原体抗原检测、黏膜腹泻病毒抗原检测、传染性鼻气管炎病毒抗原检测和呼吸道合胞体病毒抗原检测，结果表明：这个羊场的3只病羊小反刍兽疫病毒抗原检测全部阳性，其中，1只羊的传染性胸膜肺炎抗原检测阳性，另一只腹泻黏膜病毒抗原检测亦为阳性，而3只病羊的呼吸道合胞体病毒抗原检测、传染性鼻气管炎抗原检测则全部是阴性。具体结果见表：
一、ELISA检测结果：
呼吸道合胞体病毒抗原检测
传染性胸膜肺炎丝状支原体抗原检测
腹泻黏膜病毒抗原检测
传染性鼻气管炎病毒抗原检测
小反刍疫病毒抗原检测
项目名称&&&&&&&&&& 阴性对照值（N）&&& 阳性对照值（P）&&&&&&& 临界值（Co）
小反刍疫病毒抗原检测&&& 0.062&&&&&&&&&&&&& 2.260&&&&&&& &&&&&&&0.212
呼吸道合胞体病毒抗原检测0.052&&&&&&&&&&&&& 1.961&&&&&&&&&&&&&&& 0.202
腹泻黏膜病毒抗原检测&&& 0.010&&&&&&&&&&&& 2.210&&&&&&&&&&&&&&& 0.160
传染性鼻气管炎病毒抗原检0.010&&&&&&&&&&&&& 2.210&&&&&&&&&&&&&&& 0.160
传染性胸膜肺炎丝状支原体抗原检测& 0.012& &&&1.763&&&&&&&&&&&&&& 0.207
小反刍疫抗原病毒检测：OD值在0.213~0.8为+,OD值在0.8~1.5为++,OD值在1.6以上为+++
腹泻黏膜病毒抗原检测：OD值在0.163~0.8为+,OD值在0.8~1.5为++,OD值在1.6以上为+++
呼吸道合胞体病毒抗原检测：OD值在0.272~0.8为+,OD值在0.8~1.5为++,OD值在1.6以上为+++
传染性鼻气管炎病毒抗原检测：OD值在0.160~0.8为+,OD值在0.81~1.5为++,OD值在1.6以上为+++
传染性胸膜肺炎（丝状支原体）抗原检测：OD值在0.207~0.8为+,OD值在0.81~1.5为++,OD值在1.6以上为+++
二、结果分析：
1、经小反刍疫病毒抗原检测，3只病羊全部为阳性。
2、经传染性胸膜肺炎（丝状支原体）抗原检测，3只病羊中，1只阳性，2只阴性。
3、经黏膜腹泻病抗原检测，3只病羊中，1只阳性，2只阴性。
4、经呼吸道合胞体病毒和传染性鼻气管炎病毒抗原检测，3只病羊全部为阴性。
预防与治疗
预防：对于小反刍兽疫，目前国内外已有小反刍兽疫疫苗可预防本病，但保护率不一，进口的疫苗相对好一些；对于羊传染性胸膜肺炎，国内有羊传染性胸膜肺炎疫苗可预防本病；对于黏膜腹泻病，国内尚无黏膜腹泻病疫苗，只能采取综合性防制措施进行防治。
平时要加强饲养和管理，设法提高机体的免疫力，尽快建立并认真落实完善的生物安全体系，以保证畜舍卫生和畜体健康。
治疗：小反刍兽疫和黏膜腹泻病均为病毒感染所导致的疾病，时至今日，在世界上，凡病毒性疾病全都尚未研制出特效治疗药，因此，只能对症治疗，治疗原则是：抗病毒、增强抵抗力、保护胃肠黏膜、消炎、止泻、调整水盐代谢障碍和补充能量。可以使用干扰素、羊胎盘转移因子、胸腺肽、黄芪多糖、双黄连、清开灵、糖皮质激素、肠炎宁、肠道益生菌等药物并配合广谱抗生素如头孢类药物治疗，对腹泻严重以致脱水的病畜应及时的补充体液如生理盐水、碳酸氢钠、复方氯化钠和补充能量如葡萄糖、三磷酸腺苷、乙酰辅酶A、细胞色素C、脂肪乳、氨基酸和各种维生素，这对于恢复胃肠道的消化功能有明显效果。肠黏膜损伤严重的要及时灌肠（果胶铋、思密达、奥美拉唑、迪美佳、柳氮磺吡啶、云南白药等），以保护肠粘膜不再继续受到损害，进而改善动物身体抵抗力，使临床症状减轻。混合感染的病畜其消化道和呼吸道的损伤比单纯感染要严重，愈后不良，并且容易成为传染源，没有治疗价值，应及时淘汰和扑杀。羊传染性胸膜肺炎为丝状支原体感染引起，我国定为一类传染病，这个传染病病理损伤严重，传染性高，预后多不良且治疗效果不佳，不建议治疗，发现了要及时淘汰。
小结与讨论
通过对一个羊场的病羊进行的流行病学调查、临床病理学检查和血清学检测，发现该羊场的病羊发病具有小反刍兽疫病毒、传染性胸膜肺炎（丝状支原体）和黏膜腹泻病毒混合感染的特点，具体表现为：具有传染性，一旦发病，很快扩散到大部分羊只；发病后主要呈现呼吸道症状和消化道症状，表现为病羊不典型发热，鼻流流出浆液性脓性鼻液，眼有浆液性分泌物，口腔黏膜溃疡，频频咳嗽，严重腹泻等；剖检发现病羊脏器主要呈现小叶性肺炎、大叶性肺炎、胃肠炎、口腔炎、脓性鼻炎、结膜炎的病理变化；抗原检测时发现，被检测的3只病羊的小反刍兽疫病毒抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）均为阳性、1只传染性胸膜肺炎抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性；1只黏膜腹泻病毒抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性。诊断结果说明, 该羊场的羊病是小反刍兽疫病毒、传染性胸膜肺炎（丝状支原体）和黏膜腹泻病毒混合感染而引起。
3.2.1病原生物学特性
小反刍兽疫病毒是副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbolivirus)成员，同属的其他成员还有牛瘟病毒(Rinderpest virus；RVV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus；CDV)、海豹瘟病毒(Porpoise distem．per virus；PDV)等。其中小反刍兽疫和牛瘟具有相似的临床症状和病理变化，二者还具有血清学相关性。由于牛也可感染小反刍兽疫病毒，因此，当牛发生与小反刍兽疫有相似临床症状的疾病时，应该类症鉴别诊断。基因型及血清型：
根据N基因和F基因片段序列测定和遗传进化分析，可将世界不同地域的PPRV 流行毒株划分为4个基因群，但只有1个血清型。其中，2O世纪7O年代在非洲西部及近年在非洲中部分离的毒株属于PPRV I系；在西非的象牙海岸、几内亚、布基纳法索分离的毒株属于PPRVⅡ系；在东部非洲、苏丹、也门、阿曼分离的毒株属于PPRV Ⅲ系；在阿拉伯半岛、中东、亚州南部地区及非洲的摩洛哥分离的毒株属于PPRV IV系。另外在中东地区也有PPRV Ⅲ系毒株的存在。目前，上述这个羊场所发生的小反刍兽疫究竟是哪一型，尚未确定，还需要进一步研究确定。小反刍兽疫病毒的靶细胞主要是淋巴组织和上皮细胞，从而造成呼吸道、消化道及淋巴组织的变性、坏死，引起肺炎、胃肠炎、口腔炎、脓性鼻炎、结膜炎、淋巴结炎和脾炎。本次研究未就PPRV基因群进行分析。
传染性胸膜肺炎病原体为丝状支原体丝状亚种SC小菌落型（牛生物型）(Mycoplasma mycoides subsp.mycoides，SC,MmmSC)，属于支原体科的支原体属成员。支原体无细胞壁，呈高度多形性，可由一种形态迅速转为另一种形态，通常可见球菌样、丝状、螺旋状和颗粒状等多种形态，以球菌样为主。革兰氏染色阴性，瑞特氏、姬姆萨氏染色时菌体着染良好。本菌在加有血清的肉汤琼脂上可生长成典型的“煎蛋状”菌落。
支原体对外界环境因素(如日光照射、干燥等)和化学消毒药的抵抗力不强，在空气中，特别是阳光直射下，几小时即可失去毒力，在37℃下一周即死亡，在干燥条件下迅速死亡。对青霉素和龙胆紫有抵抗力，在冰冻的肺组织中能保持毒力一年以上，对苯胺染料具有抵抗力，但1％来苏儿、5％漂白粉、1％～2％氢氧化钠或0．2％升汞均能迅速将其杀死。十万分之一的硫柳汞，十万分之一的“九一四”或每毫升含2万～10万国际单位的链霉素以及泰乐菌素，均能抑制本菌。本菌主要引起牛、羊及鹿发病，支原体的靶器官主要是肺组织及胸腔，主要引起纤维素性肺炎和纤维素性胸膜肺炎。
牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea vi2,BVDV)为黄病毒科瘟病毒属成员，与猪瘟病毒和羊边界病病毒同属，在基因结构和抗原性上有很高的同源性。血清学上存在交叉反应，而且能够突破宿主特异性发生交叉感染，因此， BVDV不仅感染牛，也感染绵羊、山羊、猪、鹿和其它反刍动物，BVDV的靶细胞主要为呼吸道及消化道黏膜的上皮细胞及淋巴细胞，主要引起牛、羊消化道黏膜糜烂、坏死，形成胃肠炎和腹泻，亦可引起淋巴组织、呼吸道黏膜的损伤，并引起相应的炎症；猪则表现为母猪的不孕、产仔数下降和流产，以及仔猪的生长迟缓和先天性震颤等。该病毒对外界因素抵抗力不强，pH3.O以下或56℃很快被灭活，对一般消毒药敏感，但血液和组织中的病毒在低温状态下稳定，在冻干状态下可存活多年。该病呈世界性分布，广泛存在于美国、澳大利亚、英国、新西兰、日本和印度等国家。据报导，我国20多个省区都有本病的发生。根据本研究所研究，在我地区的一些牛、羊及鹿场中，均有本病的发生，该病已成为严重危害我国养牛业的传染病之一。
3.2.2发病机理
粘膜腹泻病毒是危害反刍动物的重要病原之一。BVDA感染能够引起广泛的临床症状，包括病毒性腹泻，粘膜病，持续感染与免疫耐受，繁殖障碍，血小板减少与出血综合征等，其相应的致病机理也非常复杂。
小反刍兽疫病毒是危害小反刍动物的重要病原之一，为一种急性病毒性传染病，感染也能够引起组织的广泛的损伤，包括消化道（从口腔到直肠）粘膜糜烂、溃疡，病毒性肺炎。临床主要呈现发热、口炎、腹泻、肺炎、持续感染、免疫耐受及出血综合征等症状。
由丝状支原体引起的纤维素性肺炎是危害反刍动物的重要疾病之一，丝状支原体感染后主要引起纤维素性肺炎，造成的损伤比较严重，且传染性强，不易根治，病畜多因此病而糟淘汰。
小反刍兽疫病毒及黏膜腹泻病毒均具有趋淋巴和趋上皮性，主要攻击淋巴组织和上皮细胞，病毒在上皮细胞内复制并破坏上皮细胞，导致机体广泛性的上皮细胞和淋巴细胞变性坏死，致使免疫系统和上皮组织受到严重损伤，多形成后天免疫抑制，易继发其它病原的感染；丝状支原体的靶器官主要是胸腔及肺脏，丝状支原体作用于气管黏膜、肺间质及肺泡，引起气管纤毛细胞损伤，死亡和脱落，以及肺脏各级血管扩张充血，血管受损，继而发生炎性细胞浸润、浆液渗出及纤维素渗出。从而形成纤维素炎症。
上述三种病原同时或先后作用于羊体，会引起严重的呼吸道及消化道黏膜的损伤，同时引起淋巴组织的严重损伤，形成呼吸道及消化道炎症，引起严重的腹泻及呼吸道症状，同时发生严重的酸碱平衡失调和水盐代谢障碍，而丝状支原体造成的损伤又加剧了呼吸道症状，致使病羊多因严重的呼吸困难以及自体中毒，衰竭而死亡。
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