单染的细胞是凋亡权早期的细胞而双染是凋亡中期的。

需要在散点图上先画出4个象限位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。

Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外側

用标记了FITC的AnnexinⅤ作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的。

检測annexin V-FITC单染的细胞并检查FL1-FL2（或FL3）散点图保证在左上和右上象限内没有颗粒。如果有颗粒出现在上端象限则说明有荧光渗漏；此时FL1的荧光被FL2 （戓FL3）PMT检测到了

为了纠正这种现象，增加FL1漏到FL2（或FL3）荧光的补偿%（这可能在1-5%之间）如果这个调节没有有效地去除FL2的阳性信号，此时要降低FL2（或FL3） PMT的电压

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的细胞而双染是凋亡中期的。

你需要在散点图上先画出4个象限位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。

这个方法有很多假阳性要注意。你在收集细胞时的方法很可能造成细胞膜的损伤，导致细胞膜的磷脂层暴露从而结合annexin V, 导致假阳性。

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