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（计算机应用技术专业论文）基于WEB+SERVICE的OLAP工具的设计与实现
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全细胞脂肪酶生催化剂的构建及其在生物转化中的应用.pdf107页
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全细胞脂肪酶生催化剂的构建及其在生物转化中的应用
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浙江大学博士学位论文 摘要 摘要 绿色化工的兴起为高效率、低能耗、低排放生产化工产品提供了充分保障。生物转化是绿色
化工的重要组成部分，脂肪酶由于其催化反应及底物类型多样而在生物转化中扮演了重要角色。 目前应用的脂肪酶主要是游离型脂肪酶或基质固定化脂肪酶。近年来，全细胞生物催化剂做为降
低酶催化剂成本的最有前景的方法之一，引起研究工作者的重视。酵母展示表达系统构建的全细
胞脂肪酶生物催化剂由于使酶分子成为细胞壁的一部分并且展示在细胞表面，故不仅在活性和稳
定性方面显著高于游离酶和基质固定化酶，且大大降低了生产成本，可多次重复利用，为脂肪酶 的高效生物转化研究及应用提供了有效的途径。 本论文根据酵母密码子偏爱性优化设计脂肪酶ROL和CALB两个基因，利用酿酒酵母和毕
赤酵母表面展示表达系统，用连接肽将脂肪酶与酵母细胞壁成分晓凝集素连接，成功构建了4个
重组酵母全细胞脂肪酶生物催化剂。以酿酒酵母表面展示表达ROL的全细胞脂肪酶生物催化剂
为例，研究其酶学性质、水相油脂水解应用、非水相生物柴油合成应用及分子印迹法的影响等方
面展开研究工作，并得出以下主要结论： 1，三丁酸甘油酯平板水解圈法鉴定阳性克隆及液体培养基发酵上清液测定无脂肪酶活性，
证明了酿酒酵母表面展示表达ROL的全细胞脂肪酶生物催化剂构建成功。据我们所知，这是首
次报道Q凝集素酿酒酵母展示表达系统与密码子优化技术结合，从而获得了高酶活的全细胞脂肪
酶生物催化剂。其水解酶活为25士0．89 7．0，酯化酶活为 u／g干细胞，最适温度40。C，最适pn
5．12 U／g干细胞。 2，以水解三丁酸甘油酯为例，研究了全
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