荣耀9和华为与荣耀的区别P10和华为与荣耀的区别P10 Plus有什么区别

我要问题描述
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网页上打开的视频看不了了。就是看的时候画面模糊。求大神帮忙!!
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本帖最后由 绝对冰点 于
14:04 编辑
如图所示。。
感谢您在解决问题后修改标题分类并说明解决方法!
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你可能没有安装相应的观看插件。
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换个视频试了没有
更新下flash
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鼠标移动到画面上点开右键启用硬件加速关掉 我的以前也是这样的关掉就好了
感谢您热心帮助他人,论坛有您更精彩!
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尘起 发表于
鼠标移动到画面上点开右键启用硬件加速关掉 我的以前也是这样的关掉就好了
灰常感谢!!!!!好了
问题解决后请编辑帖子,将主题分类改为[已解决]并附上解决的方法&
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看看视频插件是不是好的
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Powered by不知道是不行还是上网卡不好,总是打不开软件,怎么办,求大神支招!求救!!!!!QQ能上旺旺能上。。。
全部答案(共7个回答)
打不开,一般都是软件安装有问题,建议重新安装软件。
1.系统文件损坏
系统文件被破坏,如Win2K下的KERNEL32.DLL,Win98 FONTS目录下面的字体等系统运行时基本的文件被破坏,系统在启动时会因此...
显卡, 或是网络太低。
太老的机子、特别是老笔记本多数是硬件问题,除了花钱没有别的办法。
内存配到512M以上的机子,上网都够用,如果卡,就是系统问题。介绍一个懒人办法:建议你下载金...
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目的基因和表达载体总是连接不上,跪求大神帮忙。
各位大神好,我现在在做一种内切蛋白酶的基因克隆与表达。遇到的问题是该目的基因与表达载体总是连接不上。可以确定的是酶切、连接、转化操作都没有问题。但是筛选平板上总是一个菌落都不长。现在怀疑是不是因为表达载体上的P43启动子是组成型启动子,重组表达质粒转化进入感受态细胞DH5a后即启动了该内切蛋白酶基因的表达,从而对细胞产生毒性,将细胞杀死,导致平板上长不出菌落。在这一步已经卡了很久了,希望有类似经验的大神不吝赐教。
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关于目的基因和表达载体总是连接不上,跪求大神帮忙。的相关话题在小木虫APP已经有873位虫友给出了详细回复。
赶快查看回复吧!
那个是我写错了,双酶切肯定用的是BamHI,XbaI嘛。我也做过将目的片段直接连接表达载体,也是没有单菌落长出来。非常感谢你的回复。
你说的很对。我前期是连接pET-22b(+)载体,非常容易就连接上了。IPTG诱导表达也很不错。但是现在连接这个表达载体就一直连接不上。
听你这么一说还真有可能是细胞毒性的事情,内切酶随着细胞生长就表达了,在对数期细胞快速生长需要表达多少代谢相关的酶啊,你的内切蛋白酶随便切几个关键代谢酶那细胞当然就不长了啊。
& & 如果是这样你就得尝试一下用枯草杆菌表达系统了,把酶直接分泌出去就没事了。
还有你这个载体是真核载体还是自己构建的载体??看着好像酵母的表达载体~~但是酵母的载体好像又不是用的P43的启动子
谢谢你的提醒,我用同样的方法将这个载体连过别的基因,非常顺利。唯独这个基因连接不上。我认为酶切位点距离太近酶切效率肯定是会受影响,但是不会导致完全切不动。
我这个是自己构建的大肠-枯草杆菌穿梭载体。先在大肠杆菌中构建好重组表达质粒,然后导入枯草杆菌中进行分泌表达。可是现在重组表达质粒都构建不成功。构建重组质粒总不能在枯草芽孢杆菌中进行吧。连接液直接转化枯草芽孢杆菌感受态是不可行的吧?
载体的问题基本可以排除。因为我用同样的载体、同样的体系、同样的方法连接别的目的片段做过表达,非常顺利。非常感谢你的提醒。
缩短酶切时间16度1小时,试过没
没试过。你的意思是说16度酶切一小时?为什么要这样做呢?
你好,如果酶切位点没错的话,那你可能是酶切后的产物浓度不够,还有就是酶切不成功,要不不会不长的。
你再检查下你用的载体的抗性有木有弄错,还有转化时平板加入抗生素的浓度也要注意,希望对你有帮助
非常感谢。你说的当然有帮助,我再仔细检查下所有可能出现问题的地方。
什么都没错的话,会长没有被切开的质粒的菌,我觉得有可能是非特异酶切,把质粒都切碎了
你是怎么解决这个问题的呢?
现在也正在做,试了多次以前的经验也没有成功连接上,继续尝试
如果你还是不能排除是酶切位点太近而导致双酶切不彻底而导致酶连失败的话,那就做个分步酶切,先单酶切后检测一下,确认线性化后,再用另一个酶切,如果酶切buffer兼容的话,直接进行第二个酶切,如果buffer不兼容的话,最好切完一个回收后再切另一个,当然这样做中途损失会很大,所以你得保证你的基因和质粒够多~~
我现在正在尝试用诱导型的pHT系列表达载体。
我现在正在尝试用诱导型的pHT系列表达载体。
嗯,有空可以尝试一下。
转化其他细胞看看,比如低拷贝的细胞,这样会降低毒性。
扯吧,酶切位点离得太近不好切也只能蒙下外行吧,简直是个大笑话
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