RNA剪接与RNA编辑有何可变剪接的生物学意义义 15

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(生物化学与分子生物学专业优秀论文)Synaptotagmin+Ⅰ基因选择性剪接与RNA编辑的进化与功能分析.pdf76页
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中文摘要 真核生物RNA的成熟通常需要经历复杂的转录后加工过程,其中包括修饰、异构、剪
接和编辑等。选择性剪接在真核生物蛋白质组的扩容以及新增功能的赋予中起着重要的作
用。选择性剪接的多种形式在功能调控水平上受到的重视与日俱增,特别是通过改变生物
大分子局部结构的细微调控对重要功能产生的影响。 本论文对无脊椎动物特别是昆虫中的synaptotagmfn
剪接现象进行了系统分析,除了验证前人发现的剪接位点并不保守外,进一步鉴定到一更
为保守的串联选择性剪接位点。同时在蚊子的sytI同源基因中发现剪接补偿的新现象,即
当一个剪接位点消失时会通过另一个剪接位点的出现实现对功能调控的回馈。 蜜蜂sytf的同源基因在相对保守的串联剪接位点上,第二个剪接受体发生了G到A的
突变 其它物种均为G ,失去选择性剪接的能力。为了验证该位点在进化上的保守性,我们
运用了定点突变的手段 site-directedmutagenesis 将A突变为G,制作用于研究剪接的
minigene,通过体外转录与剪接实验,发现了选择性剪接的重现,证明该位点在昆虫
的缺失。 . 同源建模表明C2B功能域上插入的2-3个氨基酸会在1
结构。为了进一步验证该位点通过剪接对SytI蛋白在功能上的影响,我们通过同源建模对
两种剪接形式的蛋白结构进行了预测,通过结构的差异预测到短肽的插入或缺失可能对该
功能结构域的阳离子结合能力有一定的影响。
性消化结果明,编辑对蛋白质稳定性有一定的帮助。
关键词:转录后加工,选择性剪接,RNA编辑,定点突变,体内剪接 n 知识水坝@damdoc Abstract delicateand RNA onrather compleX of usuallydepends Maturationeukar rotic residual processes,
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