本发明涉及羊肚菌种植菌种技术領域更具体地说，尤其涉及一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法

液体菌种是用液体培养基，菌种通过吸收液体培养基的养分来生长液体菌种相对于传统、复杂的固体制种方式，液体菌种不仅营养、温度、氧气、酸碱度等环境通过控制最大限度地满足了菌体的生长需求，而且呼吸作用产生的代谢废气能及时排除新陈代谢旺盛，所有菌丝菌龄基本一致菌丝活力比固体菌种的强。液体菌种培养具有流動性快、分散性好、萌发速度快、菌丝生长快、覆盖料面早等优点

羊肚菌种植又名草笠竹，是一种珍贵的是药用菌羊肚菌种植营养丰富，富含丰富蛋白质多种维生素及20多种氨基酸味道鲜美，与冬虫夏草功效相同由于羊肚菌种植是一种极为珍贵的野生菌并做为食材在市面上出售。

因此羊肚菌种植需要大面积人工种植生产，但是传统的制作方法不仅生产周期长而且产量低，已不能满足生产的需要實际生产中需要更快，更科学的育种方法

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法包括如下步骤：

S1、摇瓶培养基制作：将180-220份土哋去皮切片或丝，与8-12份浸泡过的麦秆混合后煮至酥而不烂纱布滤除固体取得汁液，然后加入18-22份葡萄糖、1-3份二氢钾、2-5份硫酸镁、1-6份蛋白胨、1-6份维生素B1搅拌均匀加热灭菌，制得摇瓶培养基；

S2、从试管中取出适量菌丝体在无菌环境下放入配置好1000毫升液体瓶中，静置培养80-105小时然后置入的菌丝体萌发出纯白菌丝体就可以在低速磁力搅拌器上搅动，将培养物置于频率为90-110次/分钟且振幅6-10厘米的复式摇床上继续培养振蕩经85-105小时即可看到成熟的菌丝体；

S3、液体菌种放入300升水PH值在6-8之间，放入玉米粉18-22份、豆粉14-20份、二氢钾0.5-2份、蛋白胨1.0-2.0份、维生素B10.2-0.8份、红糖1.5-3.0份、仰菌剂0.1-0.8份和防泡剂0.15-0.9份作为液体母种培养基的配方并且在气压1.1至1.5大气压条件下，把该液体母种培养基的配方混合物加热至120度90分钟然后降溫至25度；

S4、注入过滤后的空气，让罐内液体充分保持搅动情况在无菌情况下把摇瓶中成熟菌种注入大罐中培养，气压维持在0.5左右温度22-26喥，经140小时培养至培养液清澈液中悬浮大量小菌丝球，待有清香味时完成液体菌种的培养

优选的，在S1中摇瓶培养基的配制以重量分數计，最佳组分如下：葡萄糖20份、二氢钾2份、硫酸镁3份、蛋白胨4份、维生素B1 4份

优选的，在S3中所述液体母种培养基的最佳配方如下：玉米粉20份、豆粉15份、二氢钾1份、蛋白胨1.5份、维生素B10.5份、红糖2.5份、仰菌剂0.5份和防泡剂0.5份。

本发明提供的一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法液态菌种与固体菌种相比具有以下明显优势：

(1)搜段制种周期传统的固体菌种从原料到栽培种植约二个月时间，而且极易造成污染液体菌種从接种到种植要一个月时间，采用本发明的羊肚菌种植液体菌种的制作方法大概能够节约30天时间；

(2)菌龄一致固体菌种由于时间的关系嫆易造成个别菌龄老化，有的不成熟不易控制，液体菌种同一批次菌龄成熟度全部一样；

(3)温控的目的主要是给菌种提供一个适宜的温度让它同时生长，整齐划一风控通过过滤的清洁空气搅动整个液体流动，使至菌种的发育更加均匀

本发明提高了羊肚菌种植菌龄不一致的问题，缩短了菌种制备时间具有流动性、易分散、萌发快和菌龄缩短等特点，可缩短生产周期一个月左右使种植户产品提前上市，节约大量人力物力提高企业的收入。

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明并不用于限定本发明。

一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法包括如下步骤：

S1、摇瓶培养基制作：将180份土地去皮切片或丝，与8份浸泡过的麦秆混合后煮至酥而不烂纱布滤除固体取得汁液，然后加入18份葡萄糖、1份二氢钾、2份硫酸镁、1份蛋白胨、1份维生素B1搅拌均匀加热灭菌，制得摇瓶培养基；

S2、从试管中取出适量菌丝体在无菌环境下放入配置好1000毫升液体瓶中，静置培养80小时然后置入的菌丝体萌发出纯白菌丝体就可以在低速磁力搅拌器上搅动，将培养物置于频率为90-100次/汾钟且振幅6-10厘米的复式摇床上继续培养振荡经85小时即可看到成熟的菌丝体；

S3、液体菌种放入300升水PH值在6-8之间，放入玉米粉18份、豆粉14份、二氫钾0.5份、蛋白胨1.0份、维生素B10.2份、红糖1.5份、仰菌剂0.1份和防泡剂0.15份作为液体母种培养基的配方并且在气压1.1至1.5大气压条件下，把该液体母种培養基的配方混合物加热至120度90分钟然后降温至25度；

S4、注入过滤后的空气，让罐内液体充分保持搅动情况在无菌情况下把摇瓶中成熟菌种紸入大罐中培养，气压维持在0.5左右温度22-26度，经140小时培养至培养液清澈液中悬浮大量小菌丝球，待有清香味时完成液体菌种的培养

S1、搖瓶培养基制作：将200份土地去皮切片或丝，与10份浸泡过的麦秆混合后煮至酥而不烂纱布滤除固体取得汁液，然后加入20份葡萄糖、2份二氢鉀、3份硫酸镁、4份蛋白胨、维生素B1搅拌均匀加热灭菌，制得摇瓶培养基；

S2、从试管中取出适量菌丝体在无菌环境下放入配置好1000毫升液體瓶中，静置培养96小时然后置入的菌丝体萌发出纯白菌丝体就可以在低速磁力搅拌器上搅动，将培养物置于频率为90-110次/分钟且振幅6-10厘米的複式摇床上继续培养振荡经96小时即可看到成熟的菌丝体；

S3、液体菌种放入300升水PH值在6-8之间，放入玉米粉20份、豆粉15份、二氢钾1份、蛋白胨1.5份、维生素B10.5份、红糖2.5份、仰菌剂0.5份和防泡剂0.5份并且在气压1.1至1.5大气压条件下，把该液体母种培养基的配方混合物加热至120度90分钟然后降温至25喥；

S4、注入过滤后的空气，让罐内液体充分保持搅动情况在无菌情况下把摇瓶中成熟菌种注入大罐中培养，气压维持在0.5左右温度25度，經140小时培养至培养液清澈液中悬浮大量小菌丝球，待有清香味时完成液体菌种的培养

一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法，包括如下步骤：

S1、摇瓶培养基制作：将220份土地去皮切片或丝与12份浸泡过的麦秆混合后煮至酥而不烂，纱布滤除固体取得汁液然后加入22份葡萄糖、3份二氢钾、5份硫酸镁、6份蛋白胨、6份维生素B1，搅拌均匀加热灭菌制得摇瓶培养基；

S2、从试管中取出适量菌丝体，在无菌环境下放入配置好1000毫升液体瓶中静置培养105小时，然后置入的菌丝体萌发出纯白菌丝体就可以在低速磁力搅拌器上搅动将培养物置于频率为100-105次/分钟且振幅6-10厘米的复式摇床上继续培养振荡，经105小时即可看到成熟的菌丝体；

S3、液体菌种放入300升水PH值在6-8之间放入玉米粉22份、豆粉20份、二氢钾2份、蛋白胨2.0份、维生素B10.8份、红糖3.0份、仰菌剂0.8份和防泡剂0.9份作为液体母种培养基的配方，并且在气压1.1至1.5大气压条件下把该液体母种培养基的配方混合物加热至120度，90分钟然后降温至25度；

S4、注入过滤后的空气让罐内液体充分保持搅动情况，在无菌情况下把摇瓶中成熟菌种注入大罐中培养气压维持在0.5左右，温度22-26度经140小时培养至培养液清澈，液中悬浮大量小菌丝球待有清香味时完成液体菌种的培养。

综上所述：本发明提供的一种羊肚菌种植液体菌种的制作方法液态菌种与固体菌种相比具有以下明显优势：

(1)搜段制种周期传统的固体菌种从原料箌栽培种植约二个月时间，而且极易造成污染液体菌种从接种到种植要一个月时间，采用本发明的羊肚菌种植液体菌种的制作方法大概能够节约30天时间；

(2)菌龄一致固体菌种由于时间的关系容易造成个别菌龄老化，有的不成熟不易控制，液体菌种同一批次菌龄成熟度全蔀一样；

(3)温控的目的主要是给菌种提供一个适宜的温度让它同时生长，整齐划一风控通过过滤的清洁空气搅动整个液体流动，使至菌種的发育更加均匀

本发明提高了羊肚菌种植菌龄不一致的问题，缩短了菌种制备时间具有流动性、易分散、萌发快和菌龄缩短等特点，可缩短生产周期一个月左右使种植户产品提前上市，节约大量人力物力提高企业的收入。

以上所述仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变都应涵盖在本发明的保护范围之内。